人皰疹病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素
點擊次數(shù)：1001 更新時間：2021-02-02
人皰疹病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
無色桿菌屬通用PCR檢測試劑盒多少錢 Achromobacter spp.PCR
鮑氏不動桿菌PCR定量試劑盒 Acinetobacter baumanniiPCR
魯氏不動桿菌PCR試劑盒哪家代理 Acinetobacter lwoffiPCR
不動桿菌屬通用PCR試劑盒價格 Acinetobacter spp.PCR
枝頂孢霉PCR試劉盒 Acremonium strictumPCR
伴放線放線桿菌PCR進口試劑盒 Actinobacillus actinomycetemcomitansPCR
胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測試劑盒多少錢 Actinobacillus pleuropneumoniaePCR
馬杜拉放線菌PCR定量試劑盒 Actinomadura maduraePCR
白樂杰馬杜拉放線菌PCR試劑盒哪家代理 Actinomadura pelletieriPCR
牛型放線菌PCR試劑盒價格 Actinomyces bovisPCR
戈氏放線菌PCR試劉盒 Actinomyces gerencseriaePCR
衣氏放線菌PCR進口試劑盒 Actinomyces israeliiPCR
內(nèi)氏放線菌PCR檢測試劑盒多少錢 Actinomyces naeslundiiPCR
化膿放線菌PCR定量試劑盒 Actinomyces pyogenesPCR
放線菌屬通用PCR試劑盒哪家代理 Actinomyces spp.PCR
上一篇 兔半蛋白酶抑制劑ELISA試劑盒注意事項 下一篇 梅毒螺旋體梅毒亞種PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則
