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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838
 
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產(chǎn)品名稱:
非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838
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產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838相關(guān)產(chǎn)品:大鼠P0蛋白抗體ELISA檢測試劑盒圖片
大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1ELISA檢測試劑盒說明
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  非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838

貼壁生長

EY-X63408

細(xì)胞名稱  非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838
形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞于1984年建系,源于一位59歲患有非小細(xì)胞肺癌的白人男性吸煙者,從患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶分離而來。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:6傳代;2~3天換液1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
雜交瘤細(xì)胞株;HR00213-5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgG

穩(wěn)定表達(dá)豬CD163分子的小鼠肺泡巨噬細(xì)胞細(xì)胞系;MH-SCD163形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-TACSTD2 Polyclonal Antibody

等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用N,N’-二環(huán)己基脲Human RBMX2 ELISA Kit
人鼻咽癌-紅色+熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Bacillus  subtilisN,N’-二環(huán)己基脲Human RBM39 ELISA Kit
人食管癌拉丁屬名: Monascus purpureus3-氟-4-(三氟甲基)Human RBM28 ELISA Kit
β-tc-6小鼠胰島素瘤胰島β規(guī)格: 1ml甘油管1支,20ul質(zhì)粒,一般次日下午3-氟-4-(三氟甲基)Human RBM4 ELISA Kit
人正常拉丁屬名: Massilia  brevitalea2-溴代異丁酸叔丁酯Human RBM42 ELISA Kit
人正常皮膚拉丁屬名: Streptomyces angustmyceticus2-溴代異丁酸叔丁酯Human RBM46 ELISA Kit
人口腔表皮樣癌拉丁屬名: Mrakia frigida2-溴代異丁酸叔丁酯Human RBM41 ELISA Kit
人骨髓橫紋肌肉癌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2,5-二溴苯磺酰氯Human RASGRP3(Ras guanyl-releasing protein 3) ELISA Kit
人胸腺激酶缺陷系用途: 與大豆共生固氮良好。2,5-二溴苯磺酰氯Human RBM14 ELISA Kit
SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維拉丁屬名: Enterococcus2-甲氧基茴香硫Human RBM15 ELISA Kit
人口腔癌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-甲氧基茴香硫Human RASIP1 ELISA Kit
人前列腺正常拉丁屬名: Oceanobacillus kimchiiN-Boc-N'-Cbz-L-賴氨酸Human RASAL2 ELISA Kit
急性淋巴用途: 微生物肥料N-Boc-N'-Cbz-L-賴氨酸Human RASSF4 ELISA Kit
胸膜積液B淋巴注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用N-Boc-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽Human RBBP6 ELISA Kit
人癌拉丁屬名: Aspergillus  niger三異叉酮基膦Human RASEF ELISA Kit
人類胚胎干拉丁屬名: Aeromicrobium  fastidiosum雙十烷基二甲基Human RASGEF1A ELISA Kit
人誘導(dǎo)型多能干拉丁屬名: Bacillus subtilis雙十烷基二甲基Human RBBP8 ELISA Kit
脂肪來源人MSC人脂肪間充質(zhì)干注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-氟-6-三氟甲基芐

非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒IAAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒IAAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒IAPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

(cAMP)ELISA試劑盒IAPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒IAPPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒ICADELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒ICAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

兔血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒ICAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H838
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021-69985169
13611928337

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