商品詳情：
別稱 H1299; H-1299; NCIH1299
種屬 人類
年齡（性別） 男性，43歲
組織來源 肺癌：非小細(xì)胞肺癌；轉(zhuǎn)移灶：淋巴結(jié)
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 NCI-H1299細(xì)胞來源于一個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，患者接受了初期放療。NCI-H1299細(xì)胞均一性的部分缺失p53蛋白，并缺少p53蛋白表達(dá)。NCI-H1299細(xì)胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~30小時
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
基因表達(dá)情況 These cells stain positive for keratin and vimentin but are negative for neurofilament triplet protein. neuromedin B, The cells have a homozygous partial deletion of the p53 protein, and lack expression of p53 protein. The cells produce neuromedin B.
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-5803
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞細(xì)胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6246 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟：
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 | RM-1+LUC小鼠前列腺癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞 | TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人頜下腺囊腫細(xì)胞 | CBRH7919大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人甲狀腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | INS-1大鼠胰島瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人膀胱癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 | RH-35大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人甲狀腺上皮細(xì)胞 | CHO-K1中國倉鼠卵巢k1 亞克隆系 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人甲狀腺成纖維細(xì)胞 | B95-8EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人胰腺星狀細(xì)胞 | Duck embryo鴨胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人胰島細(xì)胞 | 人膽囊上皮細(xì)胞永生化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 | 豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人腎上腺包膜成纖維細(xì)胞 | 小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 人胰腺神經(jīng)腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人扁桃體動脈平滑肌細(xì)胞 | 人骨骼肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人腮腺腫瘤細(xì)胞 | 大鼠毛囊干細(xì)胞永生化細(xì)胞細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人扁桃體間質(zhì)細(xì)胞 | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
細(xì)胞接收后的處理：
1）NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞細(xì)胞系收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
點擊放大
