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產品名稱:
肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1
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  肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1

貼壁生長

EY-X63360

細胞名稱  肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1
形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 母系人肺巨細胞癌PG,單細胞法分離鑒定得到的高轉移細胞株;裸鼠體內成瘤率100,肺轉移率88%,淋巴轉移率94%。

培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:6傳代;2~3天1次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

PK1注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用3-(二氟甲氧基)苯Human SEC61alpha ELISA Kit
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣;201184拉丁屬名: faecalis4-(二氟甲氧基)苯Human SDSL ELISA Kit
小香豬皮膚;SSC-S2拉丁屬名: Streptomyces abikoensis4-(二氟甲氧基)苯Human SEC11A ELISA Kit
家豬皮膚;SSC-S1拉丁屬名: Chaetomium homopilatum3-氨基-4-酸Human SEC13 ELISA Kit
新生牛眼Tenon's囊成纖維;NBTF拉丁屬名: Lactococcus  garvieae氮氧自由基哌啶Human AKAP17A(A-kinase anchor protein 17A) ELISA Kit
新生牛眼晶體上皮;NBLE拉丁屬名: Aspergillus clavatus硫代苯甲酰Human SDR39U1 ELISA Kit
大額牛皮膚成纖維樣;BOS-1拉丁屬名: Pseudomonas citronellolis硫代苯甲酰Human SDPR ELISA Kit
白牦牛皮膚;Yak-2注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用硫代苯甲酰Human SDR42E1 ELISA Kit
荷蘭黑白花奶肺;DCL1拉丁屬名: Halomonas gudaonensis4-羥基-3-甲基吡啶Human SCN4B ELISA Kit
牦牛皮膚;BMU-S1拉丁屬名: Brachybacterium hainanense4-羥基-3-甲基吡啶Human SDCCAG10 ELISA Kit
瘤牛皮膚;BIN-S1注

肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒gp130ELISAKIT產品規格:48T/96T。

大鼠可溶性白細胞分化抗原14(sCD14)ELISA試劑盒gp130ELISAKIT產品規格:48T/96T。

大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒GP210ELISAKit產品規格:48T/96T。

大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒GP210ELISAKit產品規格:48T/96T。

大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒GP210ELISAKit產品規格:48T/96T。

大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒GP-ⅡbⅢaELISAKit產品規格:48T/96T。

倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒GP-ⅡbⅢaELISAKit產品規格:48T/96T。

倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒GP-ⅡbⅢaELISAKit產品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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