產品及特點：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬等孢球蟲通用探針法PCR熒光定量試劑盒 | Isospora suis | EY00P9048 |
運輸及保存： 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為12個月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對，定量表達分析，定性分析，SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品，設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復，則標記N+9個PCR 管，其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照（用水做模板），6個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復，則標記N+4 個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1個用于PCR陽性對照（用第4號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
N-乙酰-D-利卡靈-B;利卡靈B Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein
N-乙酰-D-(標準品) Protein Kinase C (530-558)
D-甲酯鹽酸鹽櫟櫻酸(標準品) pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)
D-甲酯鹽酸鹽連錢草（標準品） pTH (13-34) (human)
2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷連翹（標準品） pTH (3-34) (bovine)
2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷連翹苷（標準品） S-I-G-S-L-A-K
D-連翹酯苷A(標準品) SAMs Peptide
D-連翹酯苷B（標準品） Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide
2'-脫氧鳥苷-3'-單磷酸二鈉連翹酯苷E(標準品) Somatostatin-28
2'-脫氧鳥苷-3'-單磷酸二鈉蓮心堿（標準品） Substance P (1-7)
D-α-氨基己二酸蓮心堿高氯酸鹽 Substance P (1-9)
D-α-氨基己二酸蓮心堿高氯酸鹽（標準品） Substance P (7-11)
D-α-氨基己二酸蓮須（標準品） TA-0910, taltirelin
D-高苯氨酸蓮子（標準品） TRH, Free Acid
D-高苯氨酸蓮子心（標準品） Urocortin III, mouse
豬等孢球蟲通用探針法PCR熒光定量試劑盒成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)(酶聯免疫吸附試驗法)赤霉素GA3 質量規格：粘度100000mPa.s125mL×4
轉化生長因子β2(TGFβ2)(酶聯免疫吸附試驗法)赤霉素GA3 質量規格：4000mPa.s,BR125mL×4
成纖維細胞生長因子23(FGF23)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格：>99%,標準品125mL×4
胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格：>98%,BR100mL
胰島素樣生長因子結合蛋白5(IGFBP5)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格：>99%,分子生物學級125mL×4
轉化生長因子β2(TGFβ2)(酶聯免疫吸附試驗法)(標準品) 質量規格：>98%,BR125mL×4
轉化生長因子β2(TGFβ2)(酶聯免疫吸附試驗法)(植物細胞培養級) 質量規格：>98%,BR125mL×4
淋巴細胞胞漿蛋白1(LCP1)(酶聯免疫吸附試驗法)(植物細胞培養級) 質量規格：BR，日本進口分裝125mL×4
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